بررسی روش‌های ضدعفونی سطحی ریزنمونه‌ ریزوم به‌منظور کنترل آلودگی‌های قارچی و باکتریایی در باززایی گیاه آلسترومریا رقم بالانس در شرایط درون‌شیشه‌ای

نوع مقاله : مقاله کوتاه پژوهشی

نویسندگان

1 کارشناسی ارشد، گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه پیام نور، واحد کرج، کرج، ایران

2 استاد، گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه پیام نور، واحد کرج، کرج، ایران

3 دانشیار، گروه کشت بافت، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی، نجف‌آباد، اصفهان، ایران

4 مربی، بخش باغبانی، موسسه تحقیقات علوم باغبانی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

چکیده

در این پژوهش، تأثیر ترکیبات ضدعفونی‌کننده مختلف (الکل اتیلیک، هیپوکلریت‌سدیم، کلریدجیوه، ستریمید و کلرهگزیدین، دتول، سفالکسین، پرمنگنات، ریدومیل و فسفیت‌پتاسیم) بر کنترل آلودگی ریزنمونه‌های ریزوم رقم بالانس آلسترومریا مورد بررسی قرار گرفت. پس از کشت، درصد آلودگی ریزنمونه‌ها به‌صورت روزانه در تیمارها بررسی و ثبت گردید. این آزمایش در قالب طرح کاملاً تصادفی با 20 تیمار و سه تکرار مورد طراحی قرار گرفت. مقایسه‌ میانگین داده‌ها با استفاده از آزمون LSD در سطح معنی‌داری پنج درصد انجام گرفت. نتایج نشان داد که تیمار Et.Cl.Cf. (C)؛ (سفالکسین در دو مرحله)؛ الکل اتیلیک 70 درصد به‌مدت یک دقیقه، 500 میلی‌گرم در لیتر سفالکسین رقیق شده در 400 میلی‌لیتر آب مقطر به‌مدت 15 دقیقه، هیپوکلریت سدیم 3 درصد + یک قطره محلول توئین یا مایع ظرف‌شویی به‌مدت 20 دقیقه، 500 میلی‌گرم در لیتر سفالکسین رقیق شده در 400 میلی‌لیتر آب مقطر به‌مدت 15 دقیقه، بهترین روش ضدعفونی برای کنترل آلودگی باکتریایی است. تیمارهای ET.Dt.Cl (R)؛ (دتول + هیپوکلریت سدیم)؛ الکل اتیلیک 70 درصد به‌مدت یک دقیقه، دتول رقیق شده در آب مقطر به نسبت 1:40 به‌مدت 30 دقیقه، هیپوکلریت سدیم 3 درصد یا محلول توئین به‌مدت 10 دقیقه، و ET.Cl (T)؛ الکل اتیلیک 70 درصد به‌مدت 1 دقیقه، هیپوکلریت سدیم 40 درصد + یک قطره محلول توئین یا مایع ظرف‌شویی به‌مدت 35 دقیقه، بهترین تأثیر را در کنترل آلودگی قارچی داشتند. هم‌چنین تیمارEt.Cc. (L)؛ الکل اتیلیک 70 درصد به‌مدت یک دقیقه، ستریمید و کلرهگزیدین رقیق شده در آب مقطر به نسبت 1:10 به‌مدت 30 دقیقه، در کنترل آلودگی باکتریایی و قارچی بی‌تأثیر بود.

کلیدواژه‌ها

موضوعات


عنوان مقاله [English]

Evaluation of Surface Disinfection Methods of Rhizome Derived Explant in order to Control of Fungal and Bacterial Contaminations in Regeneration of Alstroemeria cv. “Balance” under In Vitro Conditions

نویسندگان [English]

  • Maryam Beigi Harchegani 1
  • Hossein Nazarian 1
  • Mohammad Ali Ebrahimi 2
  • Mahmoud Otroshy 3
  • Ebrahim Latifikhah 4
1 MSc, Department of Agricultural Biotechnology, Payame Noor University of Karaj, Karaj, Iran
2 Professor, Department of Agricultural Biotechnology, Payame Noor University of Karaj, Karaj, Iran
3 Associate Professor, Department of Tissue Culture, Agricultural Biotechnology Research Institute, Najaf Abad, Isfahan, Iran
4 Instructor, Departemant of Horticulture, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
چکیده [English]

In this study, the effect of different disinfectant substances (70% Ethylic alcohol, sodium hypochlorite, Mercuric chloride, Cetrimide & chlorhexidine, Dettol, Cephalexin, Permanganate, Ridomil, Potassium phosphite) for contamination control in rhizome derived explants of Alstroemeria cv. ‘Balance’, were investigated. After culturing, explants pollution rates for different treatments, was measured daily. These experiments were implemented in a CRD design with 20 treatments and 3 replications. Analysis of variance (ANOVA) was done compared using LSD's test at 0.05 level of probability. It was revealed that disinfection with 70% Ethylic alcohol for one min, 3% sodium hypochlorite + 1 drop of Tween or dishwashing liquid for 20 min, 500 mg diluted Cephalexin in 400 milliliter sterile distilled water for a quarter; Et.Cl.Cf (C), was the most effective method in bacterial infection control. The procedure of disinfection with 70% Ethylic alcohol for one min, Dettol 1:40 diluted in sterile distilled water for 30 min, 3% sodium hypochlorite + 1 drop of Tween or dishwashing liquid for 10 min; Et.Dt.Cl (R), and disinfection method with 70% Ethylic alcohol for one min, Cetrimide and chlorhaxidine 1:10 diluted in sterile distilled water for 30 min, which the rhizomes being rinsed with sterile distilled water, which had been sterilized with 70% Ethylic alcohol for one min, 40% sodium hypochlorite + 1 drop of Tween or dishwashing liquid for 35 min; Et.Cl. (T) revealed the best effect on fungal contamination control. Disinfection with 70% Ethylic alcohol for one min, Cetrimide and chlorhaxidine 1:10 diluted in sterile distilled water for 30 min; Et.Cc. (L), was not effective in contaminations control.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Tissue culture
  • Alstroemeriaceae
  • Sterilization
شهریاری، ا. غ.، باقری، ع.، شریفی، ا. و مشتاقی، ن. 1390. کنترل آلودگی ریزنمونه‌های ریزوم گیاه آلسترومریا (.Alstroemeria sp) در شرایط آزمایشگاهی. نشریه‌ علوم باغبانی (دانشگاه فردوسی مشهد)، 25 (1): 109-115.  
Khaleghi, A., Sahraroo, A., Rasoulnia, I. N. and Ataei, R. 2008. In vitro propagartion of Alstromeria cv. ‘Fuego’, American-Eurasian Journal of Agricultural and Environmental Sciences, 3: 492-497.
Lin, H. S., De Jeu, M. J. and Jacobsen, E. 2000. The application of leafy explant micropropagation protocol in enhancing the multiplication efficiency of Alstroemeria, Horticultural Science, 85: 307-318.
Chiari, A. and Bridgen, M. P. 2000. Rhizome splitting: a new micropropagation technique to increase in vitro propagule yield in Alstroemeria, Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 62: 39-46.
Lin, H. S., De Jeu, M. J. and Jacobsen, E. 1997. Direct shoot regeneration from excised leaf explants of In vitro grown seedlings of Alstromemeria L., Plant Cell Tissue and Organ Culture, 16: 770-774.
Pedersen, C. and Brandt, K. 1992. A method for disinfection of underground rhizome tips of Alstroemeria and Heliconia, Acta Horticulturae International Society for Horticultural Science, 325: 499-504.
Pedraza Santos, M. E., Lopez Peralta, M. C., Gozalez Hernandez, V. A., Engleman Clark, M. E. and Sachez Garcia, P. 2005. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 84: 189-198.
Nhut, D. T., Don, N. T., Vu, N. H., Thien, N. Q., Thuy, D. T. T., Duy, N. and Teixeira da Silva, J. A. 2006. Floriculture Ornamental and Plant Biotechnology. In: Teixeira da Silva J (ed) Advance Technology in Micropropagation of some Important Plants, 2rd edn. Global Science Books, UK, 325-35.
Reed B. M., Buckley, P. M. and Dewllde, T. N. 1994. Detection and eradication of endophytic bacteria from micropropagated mint plants, In Vitro Cellular and Developmental Biology-Plant-Springer, 31: 53-57.
Van Zaayen, A., Loebenstein, G., Lawson, R. H. and Brunt, A. A. 1995. Alstroemeria. Virus and Virus-like Diseases of Bulbs and Flower Crops, Wiley Publishers, Chichester, UK, pp. 237-249.